Selenite бульон е обогатителна среда със селективни свойства, предназначена да изолира патогенни бактерии от рода Salmonella (лат. Salmonella). Той е много ефективен, ако е необходимо да се открие този конкретен патоген сред други представители на чревната микрофлора. Средата се използва както за клинична диагностика, така и за санитарни цели при тестване на храни.
Общи характеристики
Selenite бульон се приготвя на базата на прах, който представлява хомогенизирана смес от различни компоненти на състава. Цветът на сухия материал може да бъде светложълт или кремав, в зависимост от вида на средата. Прахът има свободно течащи свойства.
Готовият селенит бульон е течна прозрачна среда със светложълт цвят. Тази маса се изсипва в контейнери, където се извършва сеитба за по-нататъшна инкубация.
Има три основни типа селенитен бульон:
- чиста среда - подходяща за изолиране на Salmonella както от клиничен, така и от санитарен материал;
- с добавка на манитол (двукомпонентен бульон) - предназначен да работи само с клиничен материал;
- цистеин-селенитна среда - може да се използва за изолиране на салмонела от патологичен биоматериал на пациента (изпражнения, урина и др.).
Тези типове са малко по-различни по състав и характеристики на действие.
Основната задача на селенитния бульон е да насърчава натрупването на салмонела, инхибирайки растежа на съпътстващата микрофлора. Това дава възможност не само да се открие патогенът в материала, но и впоследствие да се прехвърли в агар. Средата е разработена от Leifler, който за първи път открива селективния ефект на селенита срещу Salmonella.
Състав
Селените бульон съдържа:
- казеинов хидролизат;
- лактоза;
- натриев фосфат;
- натриев хидроселенит.
Селенит-цистеиновата среда, в допълнение към тези компоненти, съдържа L-цистеин и натриев хидроген фосфат. Съставът на бульона от манитол се различава по това, че вместо казеинов хидролизат включва пептично смилане на животинска тъкан. В такава среда няма лактоза, но има манитол. Последният действа като ферментиращ субстрат и осигурява буферните свойства на бульона.
Всички компоненти на праха, с изключение на натриевия хидроселенит, условно се наричат част A, а селективното вещество се нарича част B.
Принципът на действие и свойствата на околната среда
Selenite бульон работи като носител за съхранениесъс селективно действие. Селективният ефект се осигурява поради токсичността на селенита, който инхибира растежа на повечето микроорганизми. В същото време бактериите от рода Salmonella са в състояние да възстановят това съединение, като по този начин елиминират токсичния ефект върху собствените си клетки. Въпреки това, в резултат на реакцията се образува алкали, което намалява вредния ефект на селенита върху растежа на свързаната микрофлора и следователно става необходимо да се стабилизира рН. Тази функция се изпълнява от бактерии, които ферментират лактозата с образуването на киселина. Буферирането на средата се осигурява от фосфат.
В двукомпонентния бульон рН се стабилизира с манитол. Цистеиновата среда подобрява селективния ефект срещу Salmonella. Такъв бульон е ефективен за контролиране на инфекциозния фон при пациенти с неостър стадий на заболяването или реконвалесценти.
Проявата на характеристиките на растеж на референтните щамове в средата може да се наблюдава след 12-24 часа от началото на инкубацията. В този случай салмонелите образуват безцветни колонии.
Функции за готвене
Подготовката на средата се извършва на два етапа. Първо се приготвя разтвор със селективен компонент в размер на 4 грама натриев селенит на литър дестилирана вода. След това добавете 19 грама от основния прах (част А). Разтворът се разбърква старателно и се нагрява до пълното разтваряне на частиците, след което се излива в стерилни епруветки.
При готвене е важно да следватетемпературен режим, тъй като средата е неустойчива на прегряване. Стерилизирането на бульона може да се извърши само на водна баня или да се използва струя пара. Автоклавирането на средата е строго забранено.
