Радиоимунен анализ в микробиологията: приложение, механизъм

Съдържание:

Радиоимунен анализ в микробиологията: приложение, механизъм
Радиоимунен анализ в микробиологията: приложение, механизъм
Anonim

Съвременната медицина разполага със специфични диагностични методи, които позволяват да се установи етиологията на заболяванията при хората въз основа на дефиницията на патогена, генетично чужди вещества, които стимулират имунния отговор, нуклеинови киселини, както и алергични и имунни промени които се случват поради неговите действия. Днес RIA се използва широко в имунологията и вирусологията, тоест радиоимуноанализ, целите на поставяне, компонентите, курсът, чието отчитане ще разгледаме в тази статия. Този анализ е в състояние да открие антигени в резултат на тяхното взаимодействие с антитела.

радиоимуноанализ
радиоимуноанализ

Определение

RIA е метод за диагностициране на биологично активни вещества в течности, който се основава на реакцията на антигени с антитела при използване на белязани с радионуклиди аналогични вещества, които имат специални свързващи системи. След тяхното взаимодействиеобразува се имунен комплекс, който се отделя и се изследва неговата радиоактивност. Известно е, че радиоимунният анализ се извършва с помощта на стандартни комплекти реагенти.

Всеки реагент може да определи концентрацията на едно специфично вещество. Биологичната течност, взета от човек, се смесва с реагент, след инкубационния период свободните и свързаните радиоактивни вещества се разделят, след което се извършва радиометрия и се изчисляват резултатите. Изотоп на йод се използва за етикетиране на вещества. Маркира се и се добавя в определено количество.

радиоимуноанализ микробиология
радиоимуноанализ микробиология

Заявление

Радиоимунният анализ има широко приложение в медицината и микробиологията. Използва се за диагностициране на сърдечни и съдови заболявания, заболявания на ендокринната и други телесни системи. RIA също често се използват за идентифициране на причината за безплодието, патологията на развитието на плода. В онкологията този анализ се извършва, за да се определят маркерите на неоплазмите, за да може да се наблюдава ефективността на лечението. В имунологията RIA се използва за изследване на наличието на имуноглобулини, ензими, протеини и т.н. в кръвта. Днес този анализ ви позволява да откриете концентрацията на различни хормони до една милионна от един грам. Така радиоимунният кръвен анализ се използва широко в кардиологията, онкологията, ендокринологията, гинекологията и вирусологията.

приложение за радиоимуноанализ
приложение за радиоимуноанализ

RIA методи

Прието е да се разграничават няколко метода за анализ в зависимост от естествотореакции:

  1. Неконкурентният метод се характеризира с такива реакционни компоненти като стандартни и откриваеми антигени, буферен разтвор, изотопно-белязани антитела, определени антитела, които се свързват със сорбента. Към антителата за изследване се добавя антиген. След инкубацията се появяват комплекси антиген-антитяло, сорбентът се промива, добавят се белязани антитела, които се свързват с антигена в комплекса. Радиоактивността зависи от концентрацията на антигена, който се тества.
  2. Конкурентният радиоимуноанализ се ръководи от антигенна конкуренция. Тук има такива компоненти на реакцията като контролни и определени антигени, буферен разтвор, определени антитела, които се свързват със сорбента, както и изотопно белязан антиген. Диагнозата започва с въвеждането на антигена, който се изследва. Върху сорбента се образува комплекс антиген-антитяло. След това сорбентът се промива и белязаният антиген се инжектира. При това той се свързва с антитялото. С помощта на броячи се измерва реакцията и количеството радиоактивност. Ще бъде обратно пропорционално на количеството антиген в пробата.
  3. Непрекият метод е най-често срещаният. В този случай радиоимунният анализ на реакционния компонент има като контролен и тест серум, антигени или антитела, които са свързани върху сорбента, антитела, белязани с изотопи, буферни разтвори. Антитела или антигени, които са диагностицирани, реагират с антигени или антитела, които са свързани със сорбента. След това инкубацията се отстранява, инжектират се белязани антитела, които се свързват скомплекси антиген-антитяло.

Методология на анализа

И така, радиоимунният анализ се извършва с помощта на специални реагенти. Комплектите са стандартни, така че не се допускат грешки или нарушения. Резултатите от диагностиката са надеждни. Анализът се извършва сутрин, за това те вземат венозна кръв от човек. В лабораторията се отделя серум от кръвта, която ще се използва за RIA. Този серум се смесва с реагенти. Получената смес се инкубира при дадена температура в термостат.

Свободни и свързани изотопи се разделят в получената смес. След това полученият материал се изследва и резултатите се изчисляват. Механизмът на радиоимуноанализа има няколко възможности. Описаната по-горе техника е RIA в течна фаза, тъй като всички компоненти са в течно състояние. Има RIA и твърда фаза, където антителата се поставят в носител, който не се разтваря в течност.

радиоимунен кръвен тест
радиоимунен кръвен тест

Наличност на диагностика

Използването на този диагностичен метод в медицината става все по-популярно всяка година. Напоследък радиоимунният анализ се превърна в стандартен диагностичен метод, който може да бъде предписан от лекар при поставяне на окончателна диагноза. Дълго време този вид анализ се извършваше само в лаборатории, днес се превърна в често срещан метод за изследване. Но RIA изисква използването на скъпо оборудване (гама броячи), а комплектите с реагенти имат кратък експлоатационен живот. Всичко това е основният недостатък на такъв анализ, който го определяскъпа цена.

В допълнение, RIA наскоро започна да измества по-модерните методи на изследване, които не изискват взаимодействие с изотопи. Те включват ензимен имуноанализ. По този начин RIA е желателна в много клиники. Той отдавна се използва в големите градове и диагностичните центрове, но в обикновените болници в малките градове този анализ практически не се използва поради високата му цена.

компоненти за радиоимуноанализ
компоненти за радиоимуноанализ

Достойнство на RIA

Радиоимунният анализ има много предимства. Той е доста специфичен и има висока чувствителност, което позволява да се определи наличието на биологично активни вещества в невероятно малки количества. Този анализ се извършва много просто, човек трябва само да дари венозна кръв. Резултатите от теста са 100% точни и готови още на следващия ден. RIA също може лесно да се автоматизира. По този начин този анализ ви позволява да идентифицирате протеини, които са отпадни продукти на инфекциозни бактерии, което показва наличието на инфекция в тялото.

радиоимунен анализ на целта за отчитане на напредъка на компонентите
радиоимунен анализ на целта за отчитане на напредъка на компонентите

Диагностика във вирусологията

Най-обещаващият RIA е за вирусологията, защото ви позволява бързо да идентифицирате вирусни патогени. Това се дължи на факта, че през последните години нараства заболеваемостта от различни инфекции, които се разпространяват с висока скорост, причинявайки смъртност сред хората. Това е особено вярно за страни, които нямат високсоциално и икономическо развитие (страните от Далечния изток), радиоимунният анализ тук е просто незаменим. Микробиологията използва и този диагностичен метод за откриване на инфекциозни заболявания, причинени от патогенни бактерии. Например, RIA се използва широко за откриване на коремен тиф. В първите дни на заболяването, преди назначаването на лечението, е необходимо да се проведе изследване на изпражненията и повръщането. Резултатите от диагностиката обаче ще бъдат получени след дълго време. Тук RIA идва на помощ, анализът ви позволява да идентифицирате причинителя на заболяването за кратко време. Човек дарява кръв, на следващия ден резултатите от изследването са готови. Този анализ помага за поставянето на точна диагноза.

Резултати

Радиоимунният анализ в момента е един от най-чувствителните диагностични методи. Използва се за анализ на всяко вещество, срещу което могат да се получат антитела. Този метод позволява да се направят много проби в най-малкия обем от изследваната течност, както и да се запишат резултатите за възможно най-кратко време, тъй като може да бъде напълно автоматизиран. Този анализ е разработен през 50-те години на миналия век от Соломон Бърсън. Тридесет години по-късно той стана широко разпространен. Към днешна дата няма стопроцентова алтернатива на RIA, тъй като анализът има висока чувствителност. RIA се използва в различни клонове на медицината, както и в микробиологията и вирусологията.

механизъм за радиоимунен анализ
механизъм за радиоимунен анализ

Най-накрая

Използването на метода във вирусологията е много актуално днес, тъй като даваспособността да се изследва разпространението на инфекции, да се поставя точна диагноза и да се предписва специфично лечение. Този проблем е особено актуален за страни с ниско ниво на икономическо и социално развитие. Също така, този анализ ви позволява да откриете количеството хормони и ензими в човешкото тяло. За да получи надеждни резултати, изследователят трябва само да дари кръв за анализ. Медицината не стои на едно място, наред с радиоимуноанализа се появяват нови методи за изследване, но RIA продължава да бъде един от лидерите в медицинската диагностика.

Препоръчано: