Тази статия ще бъде посветена на феномена на реакцията на утаяване. Тук ще разгледаме особеностите на формулирането на това явление, явлението дифузия, общи характеристики, роля в човешкия живот и много други.
Въведение в феномена
Утаяването е явление от серологичен тип, по време на което разтворими антигени взаимодействат с антитела и в резултат се наблюдава утаяване - утайка.
Общата характеристика на реакцията на утаяване е форма на координирано влияние на антигена и антитялото. Тези видове взаимодействия позволяват да се определи наличието на неизвестни антигени в изследваното вещество чрез добавяне на известни антитела и антигени. Процесът на утаяване без наличието на соли ще протече по-лошо, а най-добрият оптимум е в диапазона от 7,0-7,4 pH.
Съставни части на реакция
Има три основни елемента сред компонентите на реакцията на утаяване:
- Антиген с молекулярна природа. Той е в състояние на фин тип, с други думи, торазтворим. Също така такъв антиген се нарича преципитоген, който е лизат или тъканен екстракт и т.н. Преципитогенът има характерна разлика от аглутиногена, която се крие в размера на частиците, от които се състои. Аглутиногенът има присъщ размер на клетката, а преципитогените са съизмерими с размера на молекулата. Разтворът на антигена се характеризира с прозрачност.
- Антитяло, открито в човешки кръвен серум, както и в имунен диагностичен серум, който съдържа изследваните антитела.
- Електролитите са разтвори на натриев хлорид, които са изотонични.
Производство на утайки
Създаването на реакция на утаяване е невъзможно без преципитоген, който се получава чрез смилане на материали и извличане на протеинови антигени от тях. Екстракцията става чрез кипене или други методи.
Лизати, както и екстракти от тъкани и органи, кръвен серум, различни видове филтрати на базата на микробни бульонни култури, както и солев екстракт от микроорганизми и автолизатни вещества, са поразителни пример за преципитогени.
Настройка при валежи
Сега нека разгледаме метода за настройка на реакцията на утаяване.
Извършва се пръстеновидна реакция на утаяване, която протича в специално подготвени епруветки. Серумът се въвежда в кухината на съдовете, като се излива върху стената с помощта на чучура за пипета. След това отгоре внимателно се наслоява подходящото количество утайка и след това тръбата се привежда във вертикално положение от хоризонтално. Настройката и отчитането на реакцията на утаяване е много щателна операция. Резултатът се записва след появата на бял пръстен на границата между антигена и антитялото. Ако реагиращите елементи на реакцията съответстват един на друг, тогава те се свързват, но това става забележимо след дълъг период от време на тяхното взаимодействие
Реакцията на утаяване също се извършва в паничка на Петри или върху чаша слайд, където се пренася агар гел, като се нанася на малък слой. След като се втвърди в гела, се изрязват малък брой ямки, в които ще се поставят антигени и антитела. Има два начина за извършване на това действие: методът на радиална имунодифузия и двойна имунодифузия.
Обща информация
Механиката на работата на валежите е подобна на устройството за аглутинация. Под въздействието на серума от имунен тип антигенът, който вече е влязъл в реакцията, намалява степента на дисперсност. Важно условие е прозрачността както на серума, така и на антигена.
Можете да подобрите регистрацията на реакцията, ако наслагвате антигени върху антитела. В резултат на това може да се наблюдава появата на утайки под формата на пръстен. Това явление се нарича пръстеновидно утаяване и се извършва в специални тръби с диаметър от 2,5 до 3,5 mm. Един от най-честите примери за реакция на утаяване е диагностицирането на антракс.
Утаяването дава възможност да се определи нивото на токсичност на дифтерийна култура в агар.
По време на разглежданата реакциянастъпва утаяване на антигенни комплекси и антитела. Утаяването е имунологичен феномен, който ви позволява да определите количеството антитела в кръвния серум на болен или ваксиниран човек и животни.
Последствие от титриране
Важно е да се знае, че данните, получени чрез титруване на горния метод, не могат да бъдат количествено измерими. За създаване и анализ на количествена оценка на съдържащия се брой антитела е разработена специална реакционна техника от M. Heidelberger и E. Kabat, която се основава на търсене и идентифициране на зоната на еквивалентност. Смесването на възрастовия брой на антигените с постоянен обем антисерум води до увеличаване на първоначално образуваната утайка, а след това отново намалява поради увеличаване на способността за разтваряне на антигенните комплекси. Чрез определяне на количеството антитела в супернатантите, съдържащи се във всяка епруветка, можете да откриете, че на определен брой съдове с антитела ще липсва течност. Тук, в сравнение с други епруветки, ще се образува най-голямата утайка. Благодарение на това и изваждане на антигенната протеинова утайка от общата стойност на протеините е възможно да се получи точната стойност на антителата, съдържащи се в обема на специфичния изследван серум. Освен това количеството на протеиновите молекули на утайката се определя от количеството азот или чрез колориметрични методи.
Оценка на стойности
Определянето на стойностите на утаяването в диагностичната методология трябва да вземе предвид възможността за наличие в имунния серум на антитяло, което няма свойството на преципитин, от което следва, че самата утайка може да не е образуван след реакция с антигени. Списъкът с такива молекули включва непълни антитела и някои видове от групата на гама-А глобулините.
Реакцията на утаяване в лабораторни условия намира своето приложение в различни видове модификации. Например, реакцията на термопреципитация се използва за откриване на бактериални антигени на ботулизъм, антракс и др., които не се подлагат на термична денатурация. За разлика от пръстеновидното утаяване, този тип реакция използва филтрати на въпросния материал във варено състояние.
Анализът на реакцията на утаяване в сложна смес не позволява да се характеризират свойствата на отделните елементи на сместа. В такива случаи човек прибягва до метода на утаяване в агар, а също така използва имуноелектрофереза.
Дифузни валежи
В тази област на изследване съществува концепцията за реакция на дифузно утаяване (RPD). Основава се на способността да дифундират в гела на антитела и разтворими антигени. Дифузията е способността на молекула от определено вещество да прониква в молекулите на друго вещество, което се причинява от термично движение.
Гелът е система от дисперсен тип, в която течната фаза е разпределена равномерно в твърдата фаза. Най-често за такава реакция се използва агар гел.
След даване на параметрите, вусловия, при които молекулите могат да дифундират една спрямо друга, срещата им ще бъде придружена от образуването на комплекс антиген + антитяло. Такава неоплазма е в състояние да се разпространи, намирайки се в самия гел, и ще се утаи под формата на лента, която може да бъде открита с невъоръжено око. Ако антигенът и антитялото са хомоложни, няма да се образува ивица.
Създаването на условията, при които ще се осъществи дифузия, докато е в агаровия слой, включва изливане на компонентите, но общият брой на ямките и тяхната относителна позиция се определят от реши вида на задачата, която се изисква. RPD дава на човек способността да открива и идентифицира неизвестни изолирани вируси чрез тестване с помощта на известни серуми на антитела.
Заявление
Утаяването намира широко приложение не само в диагностиката на заболявания, но намира своето приложение и в съдебномедицинската експертиза. Трудно е да си представим анализ, при който е възможно да се определи вида кръв, част от орган или тъкан, открит върху престъпно оръжие, което не използва реакцията на утаяване. По време на този процес се използват преципитиращи серуми, които се получават чрез имунизиране на различни животни и птици. Важно е нивото на серумния титър да е не по-малко от 1:10000 и също така трябва да има достатъчна специфичност. От откритото петно кръв или неговата коричка се прави извлек за физ. разтвор, на който ще бъде допълнително изложенпреципитиращ серум. Според тази реакция е възможно да се установят видовете тъканни и органни протеини както на хората, така и на животните. Получаването на мътни екстракти принуждава човек да прибягва до утаяване върху агар.
Заключения
Анализирайки прочетената информация, можем да заключим, че реакциите на утаяване са изключително важни за човек, тъй като позволяват диагностициране на различни антигени с помощта на антитела, това явление също се използва широко в съдебномедицинската експертиза и ви позволява да идентифицирате вида на кръв, тъкан или орган във връзка с определен субект. Има няколко вида и метода на утаяване, които се използват в съответствие с възникващите нужди на решавания проблем.
