Терминът "микроскопия" има гръцки корени. В превод това означава изследване на обекти с помощта на високоточни инструменти. Напоследък флуоресценцията и електронната микроскопия стават все по-популярни.
Резолюция
По правило те разбират минималното разстояние, на което могат да бъдат разположени ясно различими обекти. Степента на проникване в микроскопичния свят, способността да се вземе предвид размерът на изследвания елемент ще зависи от разделителната способност на оборудването. При голямо увеличение границите на обектите могат да се слеят. Съответно има определени граници, отвъд които приближаването на елементите е безсмислено.
Метод на луминесцентна микроскопия: механизъм
Когато енергията, погълната от дадено вещество, се преобразува във видимо излъчване, възниква сияние. Нарича се луминесценция. Това явление се дължи на факта, че някои вещества под въздействието на светлината започват да излъчват лъчи с различна (обикновено голяма) дължина на вълната. Освен това някои обекти, които при нормално осветление имат определенацвят, под въздействието на ултравиолетовите променят цвета си.
Специфики
Обект, който не може да се види под ултравиолетова светлина, може да излъчва ярък блясък, ако се третира със специално вещество. В него елементите светят в различни цветове в тъмното. Силата на радиацията е различна, но като правило е малка. В това отношение флуоресцентната микроскопия е ефективна в затъмнена стая. При използване на този тип изследване обектът се разглежда в светлината, която самият той излъчва. Химическият състав на тъканите, клетките ще повлияе на качеството на изследването. Флуоресцентната микроскопия се счита за хистохимично изследване до известна степен.
Класификация
Флуоресцентната микроскопия може да бъде първична или вторична. В последния случай обектът се обработва със специални съединения, които дават блясък. Първичната флуоресцентна микроскопия се основава на собствената способност на елемента да излъчва светлина.
Оборудване
Флуоресцентната микроскопия се извършва с помощта на различни устройства. Основният им елемент е осветителят. Оборудвана е с UV лампа. Освен това устройствата използват набор от филтри. В някои устройства има доста различни конфигурации. В зависимост от това кой цвят се използва за възбуждане на луминесценция – ултравиолетов или син, между източника на светлина и изследвания обект се поставя подходящ филтър. Тъй като сиянието на микроскопичен елемент е енергийно по-слабо от вълнуващата светлина, той ще бъде уловен само при едно условие. Излишните лъчи от източника трябва да бъдат отрязани от жълто-зелен филтър. Намира се на окуляра на устройството. Най-силно изразеният ефект на луминесценцията ще бъде, когато филтърът напълно отсече лъчите, излъчвани от източника на светлина.
От какво се състои инсталацията за видима светлина? Съдържа ярък източник на светлина и биологичен микроскоп. Между огледалото на уреда и лампата е поставен синьо-виолетов филтър. Може да бъде FS-1, UFS-3 и така нататък. Жълтият филтър се поставя върху окуляра на микроскопа. С тяхна помощ върху обекта пада синьо-виолетова светлина. Възбужда луминесценция. Но тази светлина може да попречи на виждането на сиянието. Следователно, по пътя към окото, той се отрязва от жълт филтър. Осветлението се задава по метода на Кьолер, с едно изключение. Диафрагмата на кондензатора трябва да е напълно отворена. При преглед е важно да използвате нефлуоресцентно масло за потапяне. За да намали собственото си сияние, към него се добавя нитробензен (2-10 капки / 1 g).
Луминесцентна микроскопия: приложения в микробиологията
Предимствата от този тип обучение са:
- Възможност за цветно изображение.
- Самоизлъчващи елементи с висок контраст на черен фон.
- Откриване и локализиране на определени видове вируси и микроби.
- Способността да изучавате прозрачно и непрозрачноживи организми.
- Изследване на жизнените процеси в тяхната динамика.
Трябва да се каже също, че луминесцентната микроскопия допринася за развитието на най-добрите методи на хисто- и цитохимия, експресна диагностика.
